1、前言

      抗N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体脑炎是由针对神经元表面NMDA受体的自身免疫抗体引起的脑炎症。自身免疫性脑炎（AE）的治疗，包括抗NMDA受件脑炎，在难性病例中包括皮质类固醇和静脉内免疫球蛋白（IVIGs）和或血浆交换，联合使用其他免疫抑制剂。虽然大部分患者对这些治疗的反映较好，但50%的患者仍然存在认知和行为问题，33%的患者持续癫痫发作，约2%的患者出现严重残疾，对于抗NMDA受体脑炎患者来说，只有29%的患者实现了完全康复。　　

　　最近一项临床研究表明，干细胞疗法己经成为许多疾病的一种新的选择。骨髓来源的单个核细胞和间充干细胞MSC输注是安全的，可能改善各种神经疾病患者的临床结果。自身免疫性脑炎也申请MSC应用治疗，骨髓来源的MSC能够抑制致病性T细胞和B细胞，防止脱髓鞘，增加轴突密度，在自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型中保护少突胶质细胞不发生凋亡。　　

　　Liem Nguyen Thanh项目组实验结果证明，MSC治疗后，小鼠病情缓解，存活率增加。在人类中，自体脂肪来源的间质血管组分改善了所有6例自身免疫性难治性癫痫患者的日常活动，并降低了3例的癫痫频率。

　　Figure1.间充质干细胞在脑炎治疗文献

　　2、MSCs产品标准

　　MSCs产品检测是多范围的，通过安全性检测、质量检测、理化性质检测。Liem Nguyen Thanh 项目组使用的MSCs在无异种蛋白和无血清培养条件下培养，不添加抗生素，并在第3代冷冻保存。治疗前，MSCs复苏培养至第6代。测定细胞数量、活力、MSC标记免疫表达、无菌性和内毒素水平。细胞治疗产品的放行标准为:（1）不含细菌、真菌和支原体；（2）生存力≥90%；（3）UC-MSC质量检测符合ISCT200613MSC的最低标准；（4）产品在给药途径内毒素限度内，即0.2EU/kg/h。细胞产品被运送到病房，在室温下储存，直到使用。

　　Figure2.MSC质量检测图

　　（图A）免疫表型图：第3代和第6代的细胞系均表达了高水平的MSC标记包括CD90、CD73和CD105，阴性标记为阴性包括CD45、CD34、CD19、CD11b和HLA-DR细胞。（图B）倍增时间图：从第2代到第6代的数量翻倍时间相当，表明它们处于活跃的增殖状态。种群加倍时间从17.53±1.43H到22.17±0.55H不等。（图C）菌落图：P3代时，UC-MSCs平均每1000细胞形成462.96±139.81个菌落，P3代时平均每1000细胞形成342.59±16.04个菌落。该细胞系的CFU数与29个经传代UC-MSC样品相似。（图D）三细分化图：将UC-MSCs分化为成骨、成脂和成软骨系，并分别与茜素红S、油红O和阿利新蓝孵育，以检测钙沉积、脂滴和蛋白多糖结果显示该细胞系具有MSC分化成脂、成骨、成软骨的能力。（图E）免疫抑制图：MSC与PBMC共培养72H，该细胞能够抑制来自健康供体的T细胞的增殖。（图F）核型图：UC-MSCs显示正常核型。

　　Table1.UC-MSCs细胞治疗产品　

3、MSCs的治疗抗NMDA受体脑炎第一例报告

　　NMDA受体脑炎是由患者免疫反应改变引起的。通过临床治疗，Liem Nguyen Thanh项目组报道了UC-MSCs的治疗一名5岁女童被诊断为NMDA受体脑炎，并接受免疫抑制药物和静脉注射免疫球蛋白（IVIG）治疗。尽管强化治疗，患者病情恶化，因此选择UC-MSCs治疗。在细胞治疗之前，她是永久性植物人患有弥漫性脑萎缩。三次UC-MSCs输注后，患者接受德国昏迷恢复量表(CRS)、大运动功能分类系统(GMFCS)、大运动功能测量-88（gmmf-88）、手工能力分类系统（MACS）、改良阿什沃思量表(Modified Ashworth Scale)和Denver II试验检查，患者的认知和运动功能逐步改善。探访时，她已经能走路、写字和数数了。小便功能完全恢复。脑磁共振成像（MRI）显示脑萎缩减轻。总的来说UC-MSCs对治疗脑炎具有良好的效果。

　　Table2.德国昏迷缓解量表

　　Table3.运动功能的改变表

　　Table4.DenverII检测表

　　Figure3.患者治疗前和三次UC-MSC输注后的MRI图像
　　

　　(A)第一次移植前MRI显示弥漫性脑萎缩，第三脑室和双侧脑室扩张。(B)在三次UC-MSC注射后，观察到侧脑室、蛛网膜下腔和沟轻度扩张，改善了大脑MRI图像。MRI：磁共振成像；UC-MSC：脐带来源间充质干细胞/间质细胞。

　4、MSCs临床研究表明

　　1、UC-MSCs能够抑制T细胞增殖,三次UC-MSC输注后脑萎缩明显减轻。　

　　2、UC-MSCs容易在培养中获得和扩增优势此外，由于它们的免疫原性低，免疫调节能力强，是异体使用的理想选择。　　

　　3、UC-MSCs通过分泌前列腺素E2、吲哚胺2,3-双加氧酶、白细胞介素-10、白细胞介素-4、TGF-β、TNF-刺激的基因6蛋白等多种细胞因子，抑制B细胞、NK细胞增殖，促进巨噬细胞抗炎。　

　　4、UC-MSCs还可以通过旁分泌的方式保护和再生神经细胞，它们释放许多促血管生成和神经营养因子。

　　参考文献：

　　[1] Liem Nguyen Thanh, Van T. Hoang, Huong Le Thu, Phuong Anh Thi Nguyen, Duc M. Hoang, Doan Van Ngo, Hung Cao Vu, Van Nguyen Thi Bich, Michael Heke. Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells for Severe Neurological Sequelae due to Anti-N-Methyl-d-Aspartate Receptor Encephalitis: First Case ReportCell Transplant. Cell Transplant. 2022 Jan-Dec; 31:09636897221110876.