1、什么是EB病毒?

　　EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)是疱疹病毒科嗜淋巴细胞病毒属的成员，属于人类疱疹病毒4型，基因组为DNA。

　　EB病毒具有在体内外专一性地感染人类及某些灵长类B细胞的生物学特性。人是EB病毒感染的宿主，主要通过唾液传播。无症状感染多发生在幼儿，3～5岁幼儿90%以上曾感染EB病毒，90%以上的成人都有病毒抗体。

　　2、EBV感染和移植后淋巴细胞增殖疾病

　　既然90%以上的人都曾感染过EB病毒，也都有病毒抗体保护机体免受病毒的侵袭，那么什么情况下，EBV病毒会大量复制，感染机体，从而发展成为机体无法抗衡的疾病呢?

　　答案是机体的免疫功能受到严重破坏的时候。机体的免疫功能极度低下的情况下，针对各类病毒的特异性的细胞免疫也降低，从而使机体无法清除感染或体内激活的病毒，导致病毒活动性感染和相关疾病的发生。

　　骨髓和异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)后常见的EBV感染就是这种情况。对异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)患者而言，由于预处理中的大剂量放/化疗使用，以及防止移植后移植物抗宿主病(GvHD)的发生使用的免疫抑制剂的应用，使机体的免疫功能受到严重破坏，EBV感染可发展为PTLD。

　　3、EBV感染导致的PTLD的治疗

　　PTLD(Post Transplantation Lymphoproliferative Disorder, PTLD)是异基因造血干细胞移植后的一种严重并发症，其患者死亡率高达84.6%。

　　虽然临床上使用一些抗病毒性药物、免疫蛋白等药物，如利妥昔单克隆抗体、更昔洛韦、磷甲酸钠等抗病毒药物，可以有效抑制病毒的复制，但这些药物存在明显的骨髓抑制、肾脏损伤等毒副作用;减停免疫抑制剂的方法无法在短期内修复机体的免疫功能，且移植早期减少免疫抑制剂的使用会增加GVHD发生的风险。

　　对于这些患者，细胞免疫在预防和控制病毒感染的过程中起着非常重要的作用，因此，恢复细胞免疫是预防病毒再激活所必需的。

　　4、EBV特异性的CTL细胞治疗EBV感染导致的PTLD

　　EBV-CTL细胞特性

　　EBV-CTL细胞是可以特异性识别和杀伤EBV感染细胞的细胞毒T淋巴细胞系，是生理条件下机体免疫系统抗病毒感染主要成份。通常条件下，EBV的感染可以诱导机体产生细胞毒T淋巴细胞(CTL)和辅助性CD4细胞，以便及时清除EBV转化的宿主细胞。CTL通过细胞表面的T细胞受体，识别那些被EBV感染或转化的异常细胞，通过释放颗粒酶和穿孔素杀伤靶细胞，从而达到清除感染和杀伤转化细胞的作用。

　　穿孔素/颗粒酶途径

　　CTL可释放溶解颗粒，内含两种细胞毒性蛋白质，即穿孔素和颗粒酶。穿孔素储存于静止CTL细胞内，激活后形成膜攻击复合物(MAC)可插入细胞膜，令细胞外的水分及电解质迅速进入细胞内，导致细胞崩解。颗粒酶是存在于NK细胞和CTL细胞内的一类重要的丝氨酸蛋白酶，可通过穿孔素在靶细胞膜上形成的通道进入靶细胞，也可借助颗粒酶受体内吞进入胞内，通过激活凋亡相关的酶系统而介导靶细胞凋亡。

　　Fas/FasL途径

　　激活的CTL表达膜型FasL和产生可溶型FasL与靶细胞表面的受体Fas结合，通过一系列的信号转导过程，最终活化内源性核酸内切酶CAD，进入细胞核，降解DNA，导致靶细胞凋亡。

　　细胞因子途径

　　CTL分泌肿瘤坏死因子(TNF)，如TNF-α、TNF-β。这些效应分子可分别与靶细胞表面的Fas和TNF受体结合，通过激活胞内半胱氨酸蛋白酶系统，介导靶细胞凋亡。

　　EBV-CTL细胞治疗EBV感染导致的PTLD的治疗效果

　　CTL细胞可以通过TCR受体识别由感染细胞HLA-I类分子呈递的EBV病毒抗原肽，特异性的杀伤高表达抗原的感染细胞，消灭病毒，而对其他细胞无杀生作用，在移植后，免疫系统受到抑制的情况下，可以有效的识别EBV病毒感染细胞，并不增加GVHD发生的风险。由于人体所有的有核细胞都表达I类HLA分子，因此，CTL细胞原则上可以识别和清除几乎所有感染自身细胞，到达控制EBV病毒的作用。

　　国外研究报道，对114例移植后的患者进行了EBV-CTL的输注，其中101例预防性输注的患者均没有发生PTLD，13例治疗性输注，11例达到持续缓解，主要的副反应为病变部位的局限性肿胀。Gerdemann等人制备的抗CMV、EBV、AdV三种病毒能力的CTL，其临床有效率高达80%。这些数据都表明了特异性CTL治疗移植后CMV、EBV再复发的有效性和安全性，为患者提供了更多的治疗选择。

　　Doubrovina等人做过EBV特异性CTL治疗PTLD患者有效率达到了68%，国内也有文献报道过CMV特异性CTL治疗造血干细胞移植后CMV病毒感染有效率达66%，且副作用只出现了发热。

　　细胞免疫治疗作为一种新型治疗方式，能够帮助机体建立抗病毒免疫，有效率高且副作用少，是治疗移植后EBV感染的新途径。

　　5、齐鲁细胞EBV-CTL项目的研发

　　本公司看好EBV-CTL这种新型的细胞免疫治疗方式，积极进行该领域的布局，开发针对EBV、CMV等病毒抗原的CTL细胞。

　　公司利用特殊培养体系使EBV-CTL细胞在21天的培养周期内，可以增值200倍以上，EBV-CTL细胞对特异性靶细胞的杀伤效率在效靶比为1:1的情况下达到80%以上，另外，公司开发了针对T细胞的冻存制剂，能够保证冻存的EBV-CTL细胞能够发挥和新鲜EBV-CTL细胞同等的杀伤效果，为异基因造血干细胞移植后EBV感染的患者提供了更好的治疗选择。

　　免疫疗法采用体外扩增病毒特异性的细胞毒性T细胞(CTL)，已被探索和证实为有效的治疗或预防EBV感染的方案。输注体外扩增、EBV特异性的CTL被证明是安全和有效的治疗和预防方式，这些发现对同种异体干细胞移植受体的EBV免疫治疗具有潜在的意义。

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